前沿 | 干血點檢測技術是如何幫助實現冬奧興奮劑“零出現”的？

眾所周知，興奮劑的攝入不僅對運動員的身體和生理有害，更是違背了真正的超越極限的運動精神。

為了保護運動員參加無興奮劑的體育運動的基本權利，同時做到真正的提高運動員的參賽體驗，世界反興奮劑機構（World Anti-Doping Agency ，WADA）全力領導全球的合作實驗室創新興奮劑檢測方案，來大幅度的改善采樣方法，這個創新方案就是干血點分析法，亦稱DBS（干血點采樣法，dried blood spot，DBS）。

據國家體育總局消息，北京冬奧會期間首次全面開展干血點興奮劑檢測工作。那么到底什么是干血點興奮劑檢測呢，下面就讓我們來一探究竟吧。

什么是干血點采樣？

干血點采樣聽起來陌生，其實在我們的生活中已有廣泛應用，早在1963年就報道了干血點采樣方法的首次應用：從腳跟采取血液用于診斷新生兒苯丙酮尿癥。之后，該方法進一步發展并廣泛應用于新生兒代謝異常篩查和藥物檢測等領域。

圖片來源：The Analytical Scientist

目前干血點采樣主要有兩種方式：一是通過對指尖或上臂穿刺后，將指尖血或上臂血直接制成干血點樣本；二是通過采集靜脈全血樣本后，由實驗室制成干血點樣本后進行檢測。

相比兩種采集方式，從采集效果和運動員體驗兩方面考慮，此次北京冬奧會中將采取第一種樣本采集方式進行檢測工作，以最大限度保障干血點檢查的效果。

干血點中是如何檢測出興奮劑的？

干血點采樣技術是將全血樣品收集在濾紙片上，經過干燥得到干血斑塊，再經過溶劑萃取后便可使用串聯質譜等方法對干血斑中的待檢測組分進行檢測分析。

干血點采樣卡用適宜的化學試劑處理后，能夠裂解細胞、使蛋白變性、抑制細菌等其他微生物生長。而干血點樣本只需經過室溫干燥，不需要進行任何其他處理，分析物與血液成分就可以吸附在固體纖維素基質上，具有較強的穩定性。

據WADA統計，興奮劑違規事件中近半數是合成類固醇類興奮劑違規，而睪酮是類固醇類興奮劑的主要濫用物質。傳統的尿液檢測方法很難區分尿液樣本中內源性睪酮和外源攝入的睪酮，但如果在血液樣本中檢測出睪酮酯的存在，即可確認其興奮劑違規。

從臨床上看，該法最主要的優點是，干血片的轉運、檢測和儲存都很方便。常規送檢的液體血的保管儲存條件比較嚴苛，干血片改善了這種情況。新方法作為常規尿檢、血檢的重要補充手段，大大加強了興奮劑檢測的力度。

圖片來源：中國反興奮劑中心

干血點分析法勝在何處？

我們知道興奮劑檢測手段主要有兩種：尿樣檢測和血樣分析。傳統的尿液檢測對運動員有侵犯性，收集和運輸也較為復雜，并且由于尿液容易被污染，還需要空間和巨額成本來儲存樣品。

全血采樣不僅需要大量血液以獲取分析檢測所需的足量血漿，并且對采樣環境和采樣人員要求較高。

而干血點采樣技術通�？刹捎弥讣獯┐痰姆绞讲杉�少量血液（通常少于100微升），直接將指尖血液滴到采樣卡上制備干血點樣本，就可以在實驗室中被用于檢測可疑物質了。

新型干血點采血設備與技術，圖片來源：上海體育學院國家興奮劑檢測上海實驗室

通過上面的介紹，我們不難發現干血點檢測具有樣本采集簡單、采血量小、樣本儲存和運輸成本低，并且樣本穩定性更高等優點�；�于這些優點，干血點采樣法可以大大提高被檢測的運動員數量，甚至可以讓世界邊遠地區的運動員得到血液檢測的機會，在那些地區，收集傳統的血液樣品是非常困難的。干血點樣本采集方法的應用使興奮劑檢查實現從“抽檢”向“普查”轉變，將能夠更有力地打擊使用興奮劑的違規者。

干血點血樣滴在特殊的纖維卡片上，圖片來源：見水印

公平、公正、專業地做好反興奮劑工作是確保北京冬奧會成功舉辦的重要基礎。干血點分析法在興奮劑檢測領域中的潛在優勢，定能為加強反興奮劑工作做出更大的貢獻，助力實現北京冬奧會興奮劑問題“零出現”的目標！